Le forme più comuni di perdita dei capelli (alopecia) sono causate da folli cicloclismi aberranti e cambiamenti nella morfologia dei follicoli piliferi. Tuttavia, i trattamenti attuali per l’alopecia non mirano specificamente a questi processi. Le cellule vascolari stromali di derivazione adiposa (ADSVC) che possono essere raccolte da cellule adipose sono una delle ultime scoperte in campo estetico. L’uso potenziale di terapie a base di cellule staminali (SCBT) per la riparazione e la rigenerazione di vari tessuti e organi offre un cambio di paradigma che può fornire soluzioni terapeutiche alternative, che possono essere applicate per prevenire la perdita di capelli. Questo studio mirava a presentare casi clinici di SCBT per il trattamento dell’alopecia areata mediante trapianto di ADSVC nel cuoio capelluto.
La perdita dei capelli è uno dei disturbi più comuni tra tutti i pazienti che consultano un dermatologo ed è solitamente associato a gravi disturbi psicologici, angoscia e sintomi di depressione. Le forme più comuni di perdita dei capelli (alopecia) sono causate da folli cicloclismi aberranti e cambiamenti nella morfologia dei follicoli piliferi. Cellule con proprietà di cellule staminali sono state recentemente descritte, ma il follicolo pilifero si distingue come uno dei migliori sistemi modello per lo studio delle cellule staminali adulte. I follicoli piliferi sono accessibili, ben definiti in termini di biologia evolutiva, e le loro popolazioni di cellule staminali si trovano in compartimenti o nicchie discreti. Tra i vari fattori, le alterazioni della dimensione del follicolo pilifero possono influenzare la caduta dei capelli: infatti, la dimensione di un follicolo pilifero dipende dal volume della sua papilla dermica che dipende dal numero di cellule che contiene.
Ci sono tre fasi di crescita dei capelli, che subiscono ogni follicolo pilifero. La prima fase è quando i follicoli subiscono una divisione cellulare epiteliale estremamente rapida ed eseguono programmi di differenziazione squisitamente temporizzati nella fase di crescita (Anagen). La seconda fase è quando la crescita dei follicoli si ferma durante un certo periodo, la fase (Catagen). La terza fase è quando la maggior parte dei follicoli regredisce in strutture che assomigliano a follicoli in via di sviluppo immaturi, dopo di che entrano in un periodo di quiescenza mitotica, la fase (Telogen). Le cellule staminali sono al centro di tutti gli eventi dinamici capelli che comprende una nuova esplosione di attività e in seguito rimodellamento morfogenetica come il follicolo cresce nuovamente all’inizio di una nuova fase anagen.
Il termine “cellula staminale” è dato a una cellula che ha la capacità di auto-rinnovarsi e di differenziarsi in sottotipi cellulari definiti. Cellule staminali multipotenti sono presenti in diversi tessuti adulti come midollo osseo, polpa dentale, tessuto adiposo, ecc. Cellule staminali multipotenti nel tessuto adiposo, esistenti nelle cellule vascolari stromali derivate da tessuto adiposo (ADSVC), sono una delle più promettenti popolazioni di cellule staminali identificate, poiché il tessuto adiposo umano è facilmente reperibile in grandi quantità con scarso disagio e fattori secretori da ADSVC sono stati considerati come una terapia promettente per l’invecchiamento della pelle.
Pertanto, l’uso di ADSVC autologhi può essere promettente per la perdita di capelli. Poiché la frazione vascolare stromale (SVF) è saturata con cellule staminali tra le altre cellule derivate dal tessuto adiposo, le cellule possono essere chiamate ADSVFC se usate di recente, o ADSC / ADASC o altri termini nei casi di cellule primarie collocate in coltura avendo quindi il caratteristica aderente, risultante in un insieme di cellule staminali mesenchimali (MSC). Infatti, contrariamente alle ADSC in coltura, gli ADSVC appena isolati hanno dimostrato di essere molto positivi per CD34 e positivi per CD117 e HLA-DR. Le MSC derivate dal tessuto adiposo quando ottenute per cultura sono per la maggior parte negative per CD34 e HLA-DR. Questo indica chiaramente che le cellule primarie sono significativamente più promettenti nel caso in cui abbiamo bisogno di mantenere un certo livello di CD34 nell’innesto.
Nel presente studio, abbiamo mirato a utilizzare l’innesto autologo di ADSVC per il trattamento dell’alopecia areata e per valutare la sicurezza e l’efficacia del trapianto. La sperimentazione clinica di 20 pazienti mostra l’uso di ADSVC per la crescita e il miglioramento dei capelli come trattamento prezioso.
Sono stati effettuati tre test clinici, ovvero il pull test, la qualità dei capelli e la densità dei capelli, e sono state ottenute immagini prima e 3 e 6 mesi dopo la procedura per assicurare l’autenticità dei risultati. Le immagini sono state scattate nelle seguenti posizioni per mostrare la quantità di capelli per centimetro quadrato: dalla parte anteriore, del cuoio capelluto parietale, e da vicino
Il lipoaspirato è stato diluito con soluzione salina tamponata fosfato (PBS), Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) integrata con antibiotici e centrifugata a 430 × g per 10 minuti (senza freni) per rimuovere i detriti contaminanti e globuli rossi. La fase di lavaggio è stata ripetuta 2-3 volte a seconda della qualità del campione. Il tessuto adiposo fluttuante è stato digerito con un uguale volume di collagenasi tipo I [10 mg / ml in PBS contenente 5 mM Ca 2+ / Mg 2+(C0130, Sigma-Aldrich), concentrazione finale 0,5%] a 37 ° C per 30 min con agitazione (250 rpm). La collagenasi è stata inattivata aggiungendo un uguale volume di siero autologo e il campione è stato centrifugato a 600 x g per 10 minuti. Dopo la centrifugazione, il supernatante è stato scartato e il pellet cellulare è stato risospeso in NaCl 0,9% (Alpha Laboratories, Eastleigh, Regno Unito) e filtrato attraverso un colino cellulare da 100 μm (CS003 – PNC International Co. Ltd., Seoul, Corea) per rimuovere i detriti . Dopo la centrifugazione (300 RCF / 5 min), sono stati raccolti 5 ml della frazione vascolare stromale. Tutta la lavorazione deve essere realizzata entro un tempo massimo di 90 minuti. Il numero di cellule vitali è stato determinato manualmente (metodo Trypan blue) e convalidato sull’analizzatore MACSQuant (Miltenyi-Biotech, Bergisch Gladbach, Germania) (metodo di colorazione 7AAD).
Iniezione di ADSVC e follow-up del paziente
Gli ADSVC sono stati iniettati nel cuoio capelluto del paziente secondo la seguente procedura:
(1) l’area superiore frontale, biparietale e superiore piramidale sono stati trattati per la prima volta con clorexidina asettica senza anestesia locale;
(2) per raggiungere l’area del follicolo pilifero, l’iniezione nell’area del cuoio capelluto è stata eseguita con le seguenti caratteristiche: siringa, 1 cm 3 ; ago, 4 mm; calibro, 30; e profondità, 4 mm;
(3) 0,2 ml per iniezione sono stati consegnati perpendicolarmente, separati di 1 cm in una forma quadrata su tutto il cuoio capelluto segnato in precedenza; un totale di 5 ml sono stati iniettati in 25 punti;
(4) dopo l’iniezione è stata somministrata, l’ago è stato tenuto nel cuoio capelluto per 2 s.
Dopo il trapianto, al paziente sono stati prescritti antibiotici anti-infiammatori e cefalexina non steroidei per 3 giorni. I pazienti sono stati avvisati di non fare la doccia fino a 24 ore dopo la procedura, di non prendere il sole fino a dopo 1 settimana e di non praticare sport fino a dopo 1 settimana; tuttavia, il ritorno al lavoro può essere lo stesso giorno. Il follow-up per la valutazione dei capelli era basato sui cicli dei capelli ed è stato eseguito 1 settimana, 3 mesi e 6 mesi dopo la procedura.
In questo studio, l’effetto della terapia ADSVC rigenerativa dei capelli è stato valutato in 20 pazienti (9 femmine e 11 maschi) di età compresa tra 23 e 63 anni.
L’iniezione di ADSVC aumenta il diametro dei capelli
I nostri risultati sono basati sulla densità dei capelli per centimetro quadrato, il diametro dei capelli e il test di trazione eseguito manualmente dallo stesso medico in tutte le fasi. La Tabella 3 mostra i risultati ottenuti a 3 e 6 mesi dall’iniezione di ADSVC rispetto a quelli preoperatori. Come mostrato nella Tabella 2, il diametro del pelo è aumentato significativamente ( P <0,0001) con l’iniezione di ADSVC, soprattutto 6 mesi dopo il trattamento (80,8 ± 2,4 μ e 62,8 ± 1,7 μ vs. 60,5 ± 1,8 μ per 6 e 3 mesi dopo l’intervento vs preoperatoria). In totale, 19 su 20 pazienti hanno mostrato un diametro dei capelli migliorato; solo un paziente non ha mostrato alcun miglioramento. Approssimativamente, è stato ottenuto in media un miglioramento del 32% e il miglioramento massimo è stato del 50,1% circa. Variazione significativa è stata osservata tra maschi e femmine
L’iniezione di ADSVC migliora la densità dei capelli
Possiamo notare che la densità dei capelli era significativamente aumentata ( P <0,0001) dopo il trattamento con ADSVC (121,1 ± 12,5 e 120,8 ± 12,6 rispetto a 85,1 ± 8,7 per 6 e 3 mesi dopo l’intervento rispetto al preoperatorio) (Tabella 4 ). La crescita media era di circa il 36% e l’effetto ottimale era del 61,2% (Figura 2a ). La crescita dei capelli si è verificata durante la prima fase. Dei 20 pazienti studiati, solo due non hanno mostrato alcun miglioramento significativo. Non sono state osservate differenze significative tra maschi e femmine
L’iniezione di ADSVC aumenta il test di trazione
I risultati del test di pull hanno mostrato una significativa diminuzione del numero di capelli estratti ( P <0,0001) dopo i trattamenti con ADSVC (0,80 ± 0,17 e 0,90 ± 0,20 vs 4,35 ± 0,33 per 6 e 3 mesi dopo l’intervento rispetto al preoperatorio). Abbiamo potuto notare che i capelli sono diventati più forti a 3 e 6 mesi dopo l’intervento, portando a valori di principalmente 0 e 1 nel test di trazione (Tabella 5 , Fig. 3a ). Infatti, i valori del test di pull nel gruppo di controllo variavano tra 2 e 8; tuttavia, erano marcatamente inferiori nel gruppo trattato con ADSVC. In totale, 2 dei 20 pazienti non hanno mostrato miglioramenti significativi. Tutti gli altri pazienti hanno avuto risposte normali. Inoltre, non sono state osservate differenze significative tra maschi e femmine
Discussione
Il trattamento della caduta dei capelli è una sfida per molti medici; tuttavia, il trattamento della caduta dei capelli può essere eseguito in diversi modi. Ad oggi, nessuno studio ha dimostrato che il trattamento di caduta dei capelli può essere eseguito utilizzando ADSVC con risultati soddisfacenti. La nostra ricerca è unica e la prima nel campo del trattamento della caduta dei capelli per usare gli ADSVC. La maggior parte degli studi condotti in passato erano basati su plasma ematopoietico derivato o su terreno condizionato da ADSVC (ADSVC-CM).
Questo studio ha dimostrato che il trapianto di ADSVC autologhi è sicuro ed efficace e può essere considerato una terapia incoraggiante basata sulle cellule per il trattamento dell’alopecia e un trattamento per la caduta dei capelli non chirurgico. La crescita e lo spessore dei capelli sono stati nettamente migliorati 6 mesi dopo il trattamento
Gli ADSVC iniettati in questo studio potrebbero rilasciare fattori di crescita, promuovendo così la vascolarizzazione, incoraggiando la formazione di nuovi capillari, aumentando la produzione di capelli e migliorando l’apporto di sangue al cuoio capelluto. Ciò fornisce un ambiente ideale per i follicoli piliferi per far crescere capelli nuovi, più densi e sani. Questa ricerca è l’inizio di molte serie di studi che saranno condotti in futuro per migliorare i risultati e diminuire il costo della procedura per renderla più efficiente ed economica per i pazienti. È importante notare che la maggior parte dei casi di alopecia areata (circa l’80%) si risolve spontaneamente soprattutto nei primi casi di alopecia areata. Sarà interessante studiare l’efficacia del trapianto di ADSVC per i casi di III grado e avanzato di alopecia areata.
conclusioni
In conclusione, il trattamento con ADSVC sembra molto efficace per l’alopecia areata e può rappresentare una nuova via di terapia per la rigenerazione dei capelli. L’iniezione di ADSVC favorisce una buona stabilità dei capelli aumentando la densità dei capelli, il diametro dei capelli e diminuendo il test di trazione quasi a zero. Inoltre, i pazienti devono essere selezionati molto bene in base al loro stile di vita, alla causa della caduta dei capelli e al grado di calvizie per ottenere un buon risultato con questa procedura.
